Adwaith Ksantoproteinovaya i protein: arwyddion a hafaliad fformiwla

Er mwyn sefydlu cyfansoddiad ansoddol llawer o fwydydd a ddefnyddir adwaith ksantoproteinovaya i'r protein. Bydd presenoldeb asidau amino aromatig yn y cymysgedd yn newid mewn lliw sampl prawf positif.

Beth yw protein

Fe'i gelwir hefyd yn protein, sydd yn ddeunydd adeiladu ar gyfer y corff byw. Proteinau cynnal maint y cyhyrau, adfer y strwythurau meinwe hanafu a marw o wahanol organau, boed yn gwallt, croen a gewynnau. Gyda eu cyfranogiad, yn cynhyrchu corpuscles coch y gwaed, yn cael ei reoli gan y gweithrediad arferol lawer o hormonau a chelloedd system imiwnedd.

Mae hwn yn foleciwl cymhleth sy'n yn polypeptid gael màs fwy na 6 ~ 10 ³ Daltons. Strwythur Protein ffurfio gweddillion asid amino mewn nifer fawr o bond peptid ynghyd.

Mae strwythur y proteinau

Mae'r nodwedd arbennig o'r sylweddau hyn o'i gymharu â peptidau moleciwlaidd pwysau isel yw eu bod yn datblygu strwythur gofodol tri-dimensiwn, effeithiau gyda graddau amrywiol o atyniad a gefnogir. Proteinau yn meddu pedwar-strwythur. Ar gyfer pob un ohonynt wedi ei nodweddion ei hun.

Fel sail ar gyfer y sefydliad sylfaenol y moleciwlau sy'n deillio dilyniant asid amino, strwythur sy'n cydnabod ymateb ksantoproteinovaya i'r protein. Mae'r strwythur hwn yn gyfnodol ailadrodd bond peptid -HN-CH-gyd, yn dethol radicalau rhan yn y cadwyni ochr yn asidau amino. Maent yn diffinio eiddo ychwanegol y sylwedd yn ei gyfanrwydd.

Mae'r strwythur protein sylfaenol ei ystyried yn ddigon cryf, mae hyn oherwydd presenoldeb rhyngweithio cofalent cryf mewn bondiau peptid. Mae ffurfio lefelau dilynol yn digwydd yn dibynnu ar y nodweddion a osodwyd yn y cyfnod cychwynnol.

Mae ffurfio strwythur eilaidd yn bosibl oherwydd troelli y dilyniant asid amino mewn troellog, lle bondiau hydrogen yn cael eu sefydlu rhwng y tro.

trefniadaeth lefel drydyddol o foleciwlau a ffurfiwyd drwy gymhwyso un o troellog ar y darnau eraill â bod holl gysylltiadau posibl rhyngddynt, gyda hydrogen, disulfide, cofalent neu gategori cyfansoddyn ïonig. Y canlyniad yw y gymdeithas ar ffurf globylau.

Mae'r trefniant gofodol y strwythurau trydyddol pan ffurfiwyd bondiau cemegol rhyngddynt yn arwain at ffurfio y ffurflen derfynol y moleciwl neu lefelau cwaternaidd.

asidau amino

Maent yn achosi priodweddau cemegol o broteinau. Mae tua 20 o asidau amino pwysig sy'n gwneud i fyny 'r polypeptidau mewn dilyniant gwahanol. Mae'r asid aminocarboxylic prin hefyd yn cael ei gyfeirio yn y ffurflen hydroxyproline a hydroxylysine deillio peptid sylfaenol.

Fel arwydd o adwaith protein ksantoproteinovaya cydnabyddiaeth, presenoldeb rhai asidau amino yn darparu'r newid lliw adweithyddion, gan awgrymu presenoldeb strwythurau penodol yn eu cyfansoddiad.

Fel y mae'n troi allan, maent yn asidau carbocsilig sydd wedi digwydd amnewid atom hydrogen ar y grŵp amino.

Ceir enghraifft strwythur y moleciwl yn gwasanaethu fformiwla adeileddol glycin (HNH- HCH- COOH) wrth i'r asid amino symlaf.

Yn yr achos hwn yn un o'r hydrogens CH ₂ - gall cael ei ddisodli gan garbon radical hirach sy'n cynnwys cylch bensen, amino, sulfo, carboxy.

Beth mae ymateb ksantoproteinovaya

I gael dadansoddiad ansoddol o broteinau gan ddefnyddio gwahanol dechnegau. Mae'r rhain yn cynnwys ymatebion:

• biwret gydag ymddangosiad o liw fioled;
• ninhydrin gan ffurfio hydoddiant glas-fioled;
• fformaldehyd gyda sefydlu o liw coch;
• Nogier i achosi lliw llwyd-ddu.

Wrth gynnal profi pob dull presenoldeb broteinau a phresenoldeb grwpiau swyddogaethol penodol yn eu moleciwl.

Mae ksantoproteinovaya ymateb i'r protein. Fe'i gelwir hefyd yn y dadansoddiad Mulder. Mae'n cyfeirio at yr adweithiau lliw ar gyfer proteinau, lle mae asidau amino aromatig a heterocyclic.

Un o nodweddion proses sampl o'r fath yn nitration nitrig asid gweddillion asid amino cylchol yn arbennig esgyniad y grŵp nitro i'r cylch bensen.

Canlyniad y broses hon yw ffurfio cyfansoddion nitro, a brysurodd. Mae hyn yn adwaith ksantoproteinovaya nodwedd sylfaenol.

Beth benderfynol yr asid amino

Ni all pob asid aminocarboxylic cael eu canfod gan ddefnyddio sampl o'r fath. Prif nodwedd adwaith canfod protein ksantoproteinovaya - presenoldeb y cylch bensen neu ffoniwch heterocyclic yn y asidau amino moleciwl.

Oherwydd bod y protein yn cael ei ynysu oddi wrth asidau aminocarboxylic dau aromatig, lle mae grŵp phenyl (ar gyfer phenylalanine), a hydroxyphenyl radical (yn tyrosine).

Gyda adwaith ksantoproteinovaya ei bennu amino tryptophan heterocyclic asid, indole cael cnewyllyn aromatig. Mae presenoldeb y cyfansoddion uchod yn y protein yn rhoi'r newid lliw nodweddiadol o'r amgylchedd prawf.

Pa ddefnydd adweithyddion

Am gynnal yr adwaith ksantoproteinovaya angen i baratoi 1% ateb o brotein wy, neu darddiad llysiau.

ddefnyddio fel arfer wy, a rennir ar gyfer gwahanu pellach o'r protein o'r melynwy. Am 1% ateb o brotein ei wanhau mewn swm ddeg gwaith o ddŵr puro. Ar ôl diddymiad y hylif protein sy'n deillio dylid hidlo trwy sawl haen o cheesecloth. Dylai'r ateb yn cael ei storio mewn lle oer.

Mae'n bosibl cynnal yr adwaith gyda protein llysiau. Er mwyn paratoi ar yr ateb yn cael ei ddefnyddio blawd gwenith mewn swm o 0.04 kg. 0.16 l dŵr puro. Mae'r cynhwysion yn gymysg mewn fflasg sy'n cael ei glymu am 24 awr mewn lle oer ar dymheredd o tua + 1 ° C. Ar ddiwedd y dydd, yr ateb a gyffrôdd, ac yna hidlo ohoni cyntaf gyda gwlân cotwm ac yna - papur plygu hidlo. Mae'r hylif sy'n deillio yn cael ei gadw mewn lle oer. Mae'r ateb yn bresennol yn bennaf yn y ffracsiwn albumin.

Am gynnal yr ksantoproteinovaya adwaith fel y prif reagent ddefnyddiwyd cons asid nitrig. adweithyddion pellach yn ateb o 10% sodiwm hydrocsid neu amonia, yr ateb gelatin a ffenol annwysedig.

Mae methodoleg y

Mewn tiwb glân yn cael ei wneud 1% ateb protein wyau -th neu flawd mewn swm o 2 ml. I'r diben hwn yn cael ei ychwanegu tua 9 diferyn o asid nitrig crynodedig i flocculation stopio. Mae'r cymysgedd o ganlyniad ei chynhesu, gan arwain gwaddod melyn yn raddol diflannu ac mae ei liw yn mynd i mewn i ateb.

Pan fydd yr hylif oeri i lawr yn y tiwb ar hyd y wal ychwanegwyd tua 9 diferyn o sodiwm hydrocsid, canolbwyntio, sy'n gormodol ar gyfer y broses. Cyfrwng adwaith yn dod yn alcalïaidd. Cynnwys yn dod yn lliw oren yn y tiwb prawf.

nodweddion

Ers ksantoproteinovaya o'r enw adwaith ansoddol i asid nitrig gan y camau y proteinau, mae'r sampl yn perfformio o dan cynnwys cwfl mygdarth. Sylwch ar yr holl ragofalon diogelwch wrth weithio gyda sylweddau costig crynodedig.

Efallai y bydd y datganiad o gynnwys o'r tiwb yn digwydd yn ystod y broses wresogi y mae'n rhaid eu hystyried wrth bennu mewn daliwr a dewis yr awydd.

Dylai Deialu o asid nitrig crynodedig a soda costig yn unig gan ddefnyddio pibed gwydr a gellyg rwber piped wahardd gan geg.

adwaith berthynas gyda ffenol

Er mwyn eglurder, prosesu a chadarnhad o bresenoldeb y grwpiau phenyl yn cael ei wneud gyda sampl hydroxybenzene tebyg.

Mae'r tiwb yn gwneud 2 ml o ffenol gwanhau, ac yna yn raddol ar hyd y wal, ychwanegwyd 2 ml o asid nitrig crynodedig. Yr ateb yn destun gwresogi, lle mae'n dod yn felyn. Mae'r adwaith hwn yn ansawdd y presenoldeb y cylch bensen.

hydroxybenzene Broses nitrated ag asid nitrig ac yna ffurfio cymysgedd o p-nitrophenol a o-nitrophenol mewn canran o 15-35.

Prawf Cymhariaeth â gelatin

Er mwyn profi bod adwaith ksantoproteinovaya i'r protein yn datgelu asid amino gyda strwythur aromatig, defnyddiwch proteinau nad oes ganddynt grŵp ffenolig.

Mewn tiwb glân yn cael ei wneud 1% ateb gelatin mewn swm o 2 ml. I'r diben hwn yn cael ei ychwanegu tua 9 diferyn o asid nitrig crynodedig. Mae'r cymysgedd o ganlyniad yn cael ei gynhesu. nid yr ateb ei liwio mewn melyn, sy'n profi nad oes asidau amino gyda strwythur aromatig. Weithiau mae ychydig o melynu yr amgylchedd oherwydd presenoldeb amhureddau protein.

hafaliadau cemegol

Yn y ddwy adwaith cam yn rhedeg ksantoproteinovaya proteinau. Fformiwla proses nitration cam cyntaf yn disgrifio moleciwlau asid amino ddefnyddio asid nitrig crynodedig.

Un enghraifft yw atodiad y grŵp nitro i'r tyrosine i ffurfio nitrotyrosine a dinitrotirozina. Yn yr achos cyntaf i'r cylch bensen ynghlwm un NO ₂ -radical, a bod ganddynt yr ail cyfansoddyn dau atom hydrogen yn cael eu disodli gan NO _2. adwaith tyrosine ksantoproteinovaya fformiwla gemegol a gynrychiolir gan adwaith ag asid nitrig i ffurfio moleciwl nitrotyrosine.

proses Nitration yn dod gyda pontio lliwio di-liw mewn tôn melyn. Wrth gynnal yr adwaith hwn gyda broteinau sy'n cynnwys yr asid amino gweddillion phenylalanine neu tryptoffan, a lliw y datrysiad newidiadau.

Yr ail gam yn gynnyrch adwaith o nitration o foleciwlau tyrosine, yn enwedig nitrotyrosine, gyda amoniwm neu sodiwm hydrocsid. Y canlyniad yw sodiwm neu halen amoniwm lle y lliw melyn-oren. adwaith o'r fath yn gysylltiedig â y posibilrwydd o foleciwlau nitrotyrosine symud i mewn y ffurflen quinoid. Yn dilyn hynny halen ffurfio o hynny asid nitronic, sydd â system quinone o fondiau dwbl cyfunedig.

Felly yn dod i ben ymateb ksantoproteinovaya i broteinau. Mae'r hafaliad gyflwynwyd uchod ail gam.

canlyniadau

Yn ystod y dadansoddiad o hylifau a gynhwysir yn y tri tiwbiau, yr ateb cyfeirir wanhau gyda ffenol. Sylweddau gyda modrwy bensen rhoi adwaith ansoddol ag asid nitrig. O ganlyniad, mae'n newid lliw o'r ateb.

Gan fod yn hysbys, gelatin yn cynnwys ffurf hydrolyzed colagen. Nid yw'r protein yn cynnwys strwythur aromatig o'r asidau amino. Dim newid yn lliw y cyfrwng trwy adwaith ag asid.

Yn y tiwb profi trydydd ceir ymateb cadarnhaol i'r ksantoproteinovaya proteinau. Gellir Casgliad ei thynnu fel a ganlyn: pob proteinau gyda strwythur aromatig, boed yn grŵp phenyl neu ffoniwch indole, o ystyried y newid mewn lliw o'r ateb. Mae hyn yn ganlyniad i ffurfio cyfansoddion nitro gyda lliw melyn.

Cynnal adwaith lliw yn profi presenoldeb gwahanol strwythurau cemegol mewn asidau amino a phroteinau. gelatin ENGHRAIFFT yn dangos bod ei gyfansoddiad yn cynnwys asid aminocarboxylic peidio cael grŵp phenyl neu strwythur cylchol.

Gyda ksantoproteinovaya adwaith gellir eu hesbonio gan melynu ar y croen pan gymhwyso ato asid nitrig cryf. Bydd yr un lliw yn dod yn llaeth ewynnog yn ystod ei dadansoddiad tebyg.

Yn ymarferol labordy clinigol nad yw hyn sampl lliw yn cael ei ddefnyddio ar gyfer canfod protein yn yr wrin. Mae hyn oherwydd y lliw melyn y wrin ei hun.

adwaith Ksantoproteinovaya daeth yn defnyddio fwyfwy ar gyfer meintioli o asidau amino megis tryptoffan a tyrosine, fel rhan o wahanol broteinau.